Hoefer SE640 - Manual (Page 23)

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Preparación de la muestra y carga
La muestra puede ser cargado ya sea mientras
el sandwich está en la máquina de colada o
después de la cámara de amortiguación superior
está unido. Al cargar las muestras durante el uso
de placas divisorias, las muestras deben ser car-
gados sin la cámara de amortiguación superior
en su lugar.
La cantidad de muestra cargada depende del espe-
sor del gel, la sensibilidad del método de detección
utilizado, y la cantidad de muestra se espera en
cada banda. En un sistema tampón continuo, la
muestra de proteína debe ser relativamente concen-
trada, porque no se utiliza gel de apilamiento. En
un sistema de tampón discontinuo, la zona en la
que cada especie molecular migra se agudiza por
el gel de apilamiento, de modo que la muestra no
necesita ser tan concentrada.
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Preparar los pozos
Quite el peine suavemente moviéndola de lado a lado
y luego levantándolo hacia arriba para evitar daños en
las paredes del pozo. Enjuagar cuidadosamente cada
pocillo con agua destilada para eliminar acrilamida no
polimerizada y luego drenar invirtiendo el emparedado
de gel (o lanzador). Llene cada pocillo con el tampón
de electroforesis.
Nota: Con Coomassie Blue ™
es posible detectar 1 µg de
proteína en una sola banda.
Con las manchas de plata más
sensibles, es posible detectar
tan poco como 10 ng de
proteína.